Efecto de los péptidos de matriz extracelular descelularizada de hígado sobre el esparcimiento y agregación de hepatocitos primarios con rigidez controlada

Abstract

La matriz extracelular (MEC) es una estructura tridimensional compuesta de proteínas fibrosas como colágena, fibronectina, elastina, laminina, entre otras moléculas, que regulan procesos vitales como la adhesión celular, preservación de tejidos y coordinación de señalizaciones bioquímicas; además, la MEC determina la plasticidad y especificidad celular en función de la composición y proporción de cada una de sus moléculas estructurales. En el hígado, las alteraciones en la composición y estructura de la MEC producen modificaciones en el microambiente celular, así como también en otras propiedades físicas como la rigidez o el módulo de elasticidad, que influyen en el desarrollo de enfermedades fibróticas que afectan la biología de las células hepáticas, principalmente a los hepatocitos. Dentro de este contexto, el objetivo de este trabajo fue elaborar una plataforma biomimética a partir de proteínas aisladas de matriz extracelular descelularizada (MECd) de hígados de rata para promover la adhesión y supervivencia de hepatocitos de cultivo primario. Para ello, se extrajeron hígados de rata Wistar y se descelularizaron por perfusión. Las MEC obtenidas se liofilizaron, pulverizaron, hidrolizaron enzimáticamente a distintos tiempos con pepsina y los productos se neutralizaron para obtener solamente la fracción de proteína soluble. Por otro lado, en vidrios funcionalizados, se elaboraron hidrogeles de poliacrilamida a 1 y 20 kPa conjugados con proteínas de MECd, colágena tipo I (Col I), membrana basal (MB) y proporciones 75/25 y 50/50 de Col I y MB, respectivamente, donde hepatocitos de cultivo primario fueron sembrados y evaluados durante 24 y 72 h. Los resultados obtenidos, mostraron interesantemente que los hepatocitos se adhieren preferentemente a los hidrogeles que contienen cualquiera de las concentraciones de Col I, pero no en los sustratos que contienen proteínas de MECd. Estos hallazgos sugieren que el colágeno fibrilar juega un papel importante en la adherencia y sobrevivencia de hepatocitos. No obstante, es necesario realizar mayor trabajo de investigación para encontrar la combinación ideal de proteínas de MECd y derivadas de MEC para generar plataformas de cultivo que promuevan la adherencia celular y mantengan el fenotipo de los hepatocitos.