Actividad antiproliferativa de proteínas de hojas de Alternanthera dentata (L.) Kuntze

Abstract

Las plantas poseen un gran potencial como materia prima en la obtención de fármacos para el tratamiento del cáncer. En este sentido, una familia de plantas con un potencial poco explorado, son las Amarantheaceae. Se ha documentado que esta familia de plantas tiene la capacidad de producir proteínas, como las proteínas inhibidoras de ribosomas y péptidos de bajo peso molecular que muestran actividad citotóxica y antiproliferativa en distintas líneas celulares cancerosas. En el presente trabajo, se evaluó la actividad antiproliferativa de proteínas de bajo peso molecular provenientes de hojas de Alternanthera dentata (L.) Kuntze en contra de la línea celular MCF-7. Para la extracción de proteína, se utilizaron dos tipos de hojas: HJ (hoja juvenil) y HM (hoja madura). Se ensayaron diferentes metodologías para la extracción de proteínas, tales como: el método de TCA/Acetona, precipitación con sulfato de amonio, TRI-Reagent, extracción metanólica ácida, kit de extracción de proteína total de plantas y el extracto crudo. En la HM, el extracto crudo fue el método que cuantificó una mayor concentración de proteína. Por otra parte, en la HJ, el método de TRI-Reagent fue el que proporcionó el mayor contenido de proteína. Una vez obtenidas las muestras proteicas, se cargaron en geles de electroforesis SDS-PAGE al 12 y 15% con el fin de separar las proteínas, lo que permitió seleccionar bandas proteicas en el rango de 17-35 kDa. El método de TRI-Reagent fue el que mostró el mayor número de bandas detectadas en ambos tipos de hojas. A las bandas proteicas seleccionadas, se les evaluó la actividad antiproliferativa en contra de la línea celular MCF-7 a diferentes concentraciones. Dichas concentraciones se establecieron entre los siguientes rangos: 0.551-5.512 μg/mL para B1; 3.192-31.923 μg/mL para B2; 0.346-3.461 μg/mL para B3; y 2.449-24.487 μg/mL para B4. En el caso de la HM, se encontró que dos bandas, denominadas B3 y B4 con un PM de: 27.558 ± 0.349 kDa y 17 kDa, respectivamente, que redujeron la viabilidad celular en un 68.72 % ± 0.081 aproximadamente. Las concentraciones que mostraron este efecto fueron desde 0.692 hasta 3.461 μg/mL para B3 y 4.897 hasta 24.487 μg/mL para B4. Por otra parte, en HJ, las bandas evaluadas no mostraron una reducción de la viabilidad celular en los ensayos. De esta manera, en este trabajo se encontró que proteínas de hojas de A. dentata presentan actividad antiproliferativa en contra de la línea celular MCF-7.