Efecto del estrés por elicitación con oligosacáridos de pared celular de Fusarium spp. sobre la respuesta antioxidante enzimática y no enzimática en callos de Azadirachta indica

Abstract

Azadirachta indica A. Juss (neem) es ampliamente estudiada por sus actividades biológicas, siendo los limonoides (AZRL) los principales metabolitos secundarios. Sin embargo, diversos factores ambientales afectan la producción de AZRL y los reportes acerca de su biosíntesis son escasos. Algunas estrategias biotecnológica para incrementar la producción de metabolitos secundarios son el cultivo in vitro y la elicitación con diferentes tipos de estrés abiótico y biótico. El objetivo de este estudio fue evaluar la elicitación con oligosacáridos de pared celular (OPC) de Fusarium spp., sobre los mecanismos antioxidantes enzimático/no enzimático, la producción de AZRL y de compuestos fenólicos en cultivos de callos. Los callos de A. indica con seis días de edad fueron elicitados con 1.16 y 2.32 µg de OPC mL-1 de Fusarium spp. (equivalentes a 25 y 50 µg de micelio mL-1 , respectivamente). Se cuantificó la actividad de la enzima fenil amonio liasa (PAL), catalasa (CAT), peroxidasa (POD) y ascorbato peroxidasa (APX), la concentración de compuestos fenólicos totales y AZRL en un intervalo de 0 a 72 h después de la elicitación. La adición de 1.16 µg de OPC mL-1 provocó un aumento del 273 %, 284 % y 157 % y en las actividades de CAT, POD y APX en comparación al cultivo control (5.62, 20604 y 5.63 U/mg proteína, respectivamente) respecto al promedio del control. Todas las actividades enzimáticas mostraron un comportamiento monofásico a las 36h después de la elicitación y el máximo contenido de limonoides se alcanzó después de 72 h de exposición (2000 μg AZRL/g de P.S). El tratamiento con 2.32 µg de OPC mL-1 produjo un nivel mayor de estrés oxidativo mostrando un perfil bifásico en la actividad de CAT y POD a las 18 y 36 h después de la elicitación (231 y 408 %; 827 y 1671% comparados al control, respectivamente). Mientras que APX mostró un comportamiento monofásico con un máximo a las 36 h (1781 %, respecto al control). Por lo que se concluye que la adición de OPC de Fusarium spp., incrementó la respuesta antioxidante enzimática para contrarrestar la concentración de especies reactivas de oxígeno, las cuales pueden estar involucradas con mecanismos para la biosíntesis de AZRL.