Sistema para la identificación de glúcosidos de esteviol en un cultivo de raíces de Stevia rebaudiana

Abstract

Los glucósidos de esteviol (GEs) son edulcorantes naturales no calóricos con demanda comercial creciente. A nivel mundial se ha confirmado que su uso general es seguro. La principal fuente de obtención de GEs son las hojas de Stevia rebaudiana. Las raíces de las plantas son capaces de producir GEs, pero en el cultivo de raíces adventicias in vitro en suspensión (CRAIS) se discute sobre su capacidad biosintética. Una estrategia adecuada de manejo y preparación de la muestra es fundamental para resolver controversias en cuanto a la producción de compuestos de interés. El objetivo del presente trabajo fue establecer una metodología de extracción, limpieza y análisis por infusión directa al módulo de masas en tándem con trampa de iones y ionización por electroespray (DFI-ESI-IT-MSn) que permitió confirmar la capacidad biosintética de GEs en una lína de CRAIS de S. rebaudiana. Se estableció un sistema de extracción hidrometanólica, seguido de una limpieza del extracto crudo por extracción sólido líquido (SPE) con acetonitrilo-agua y el análisis de los extractos limpios por espectrometría de masas permitió identificar los siguientes GEs: esteviósido, rebaudiósido A y esteviol/isoesteviol. Estos resultados confirmaron la capacidad de biosintesis de GEs en CRAIS de Stevia rebaudiana.