Capacidad fecundante bajo pruebas in vitro de espermatozoides ovinos sexados en gradientes de albúmina sérica humana

Abstract

En México se ha originado una creciente demanda en la producción de carne sobre el sector ovino, el estado de Oaxaca tiene una participación baja de 7.0% (SAGARPA, 2011). Para equilibrar la producción ovina en el estado y en el país se han aplicado biotecnologías reproductivas como el sexado, permitiendo a los ganaderos mantener mayores proporciones de machos y hembras en su rebaño según sea la necesidad. El objetivo de este estudio fue evaluar la capacidad fecundante bajo pruebas in vitro de EZP´s ovinos sexados en HSA. Se obtuvieron eyaculados de ovinos fértiles para realizar la separación de EZP´s en columnas compuestas por gradientes de densidad (10, 15 y 20% de HSA). Las características evaluadas en semen fresco fueron: volumen, porcentaje de motilidad, vitalidad y concentración, obteniendo valores de: 0.5 mL, 96.20%, 98.10% y 3187.56 x10⁶ mill/mL, respectivamente. Se sometieron a separación 300 x10⁶ mill/mL de EZP´s por columna y se incubaron a 37.5°C por 1 h. Se retiró cada fracción con intervalo de 10 min cada una y se determinó el porcentaje de motilidad, vitalidad y concentración espermática para los 3 gradientes. Se evaluaron las pruebas in vitro de capacidad fecundante de EZP´s después de la separación (interacción ovocito – espermatozoide y penetración). Se observó que la motilidad del semen fresco (96.20%) disminuyó en comparación a la motilidad de la capa de HSA al 10% (72.20%). Conforme los EZP´s alcanzan las capas de mayor densidad, el porcentaje de vivos disminuye, siendo de 70.20, 84.20 y 80.20% para el 10, 15 y 20%, respectivamente, observándose el mismo comportamiento para la concentración espermática de los 3 gradientes (106.3, 83.77 y 75.19 x10⁶ mill/mL). Bajo 1 er prueba in vitro para capacidad fecundante con semen fresco y sexado del 20% se determinó por conteo una cantidad >1000 EZP´s en contacto con la ZP de ovocitos inmaduros, con la 2 da prueba in vitro los mismos ovocitos se incubaron junto con los EZP´s por 12 hrs, obtuvimos porcentajes de 86 y 90% de ovocitos penetrados con semen fresco y sexado del 20%, se observó mediante tinción el núcleo del EZP´s en proceso de descondensación dentro del citoplasma del ovocito. Se determinó mediante análisis de Chi cuadrada en SPSS que el sexado en gradientes de densidad en HSA no tiene efecto estadísticamente significativo sobre los EZP´s sexados (p>0.05).