Separación de los espermatozoides “Y” en ovinos Katahdin en diferentes gradientes de densidad de albumina sérica humana

Abstract

El objetivo del presente estudio fue separar espermatozoides “Y” provenientes de eyaculados ovinos mediante gradientes de densidad de HSA, se utilizaron 40 eyaculados, los cuales se dividieron en dos tratamientos: SSD (semen sin diluir) y SD (semen diluido) y fueron sometidos para su separación a tres gradientes (10, 15 y 20 %) de concentración de HSA, incubados a 37 °C durante 1 h. Se evalúo la motilidad, concentración y vitalidad espermática pre y post separación, se identificó el repertorio de espermatozoides “Y" mediante la amplificación específica del gen que codifica la proteína Amelogenina mediante la técnica de PCR. La motilidad del gradiente final (20 % HSA, 83.15 ± 1.56 ) no muestra diferencia significativa comparada con el valor inicial de motilidad (88.00 ± 2.10), la vitalidad de los espermatozoides aumento significativamente (P≤0.05) en el semen sexado con respecto al semen sin sexar, sin embargo, para el semen sexado no hubo diferencia significativa (P≥0.05) entre gradientes, se identificando el gen Amelogenina, en los espermatozoides del gradiente de concentración del 20 % HSA contra el control positivo, observando un mismo tamaño de banda, por lo cual se infiere una mayor concentración de espermatozoides portadores del cromosoma “Y” en dicho gradiente, siendo igual al control positivo, dicha expresión es igual para los tratamientos de semen sexado y sin sexar. En conclusión, la técnica de gradiente de densidad permite seleccionar subpoblaciones de espermatozoides Y mediante el gradiente de 20% de HSA, misma que puede ser verificada mediante la técnica de PCR.